Prueba de la Catalasa

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Prueba de Catalasa

Fundamento

La catalasa es una enzima que poseen la mayoría de las bacterias aerobias. Descompone el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. El desprendimiento de burbujas procedentes del oxígeno indica que la prueba es positiva.

Materiales y reactivos

Para el correcto desarrollo de la práctica serán necesarios los siguientes materiales:

  • Portaobjetos.
  • H2O2 de 10 volúmenes Cultivos en fase exponencial de bacterias.
  • Asas e hilos de siembra.
  • Pipetas Pasteur.

Método

IMG_2411 copy11. Colocar una gota de agua oxigenada sobre un portaobjetos con ayuda de una pipeta Pasteur.

2. Suspender la bacteria.

3. Detectar la formación de burbujas.

Prueba de Oxidasa

Fundamento

Determina la presencia del citocromo C, El citocromo C oxida al NNN’N',tetrametil,1-4,fenilendiamina (solución acuosa al 1% (p/v). La oxidación se detecta como color azul.

Materiales y reactivos

Para el correcto desarrollo de la práctica serán necesarios los siguientes materiales:

  • Papel de filtro cortado (trozos de 3x 1 cm).
  • Placas de Petri.
  • Reactivo de oxidasa: Solución al 1% de NNN’N', tetrametil, 1-4 fenilendiamina en agua destilada. El reactivo de oxidasa es bastante tóxico, manejar con precaución. Se altera por la luz y el oxígeno, por lo que debe ser de preparación extemporánea y protegerse envolviéndolo con papel negro.

Método

1. Poner un trozo de papel de filtro sobre una de las tapaderas de una placa de Petri.

2.Añadir una gota del reactivo de oxidasa.

3. Depositar sobre el reactivo masa bacteriana (actuar de forma rápida y con un asa de platino nueva o con un palillo de dientes).

Resultado

IMG_2418 copy1La reacción positiva la indica un color azul-violeta intenso antes de 10 segundos.

La imagen muestra varias bacterias que carecen de citocromo c oxidasa terminal y dos que las poseen (posiciones sobre las 11 y sobre las 13).

Autoevaluación

Para la autoevaluación vaya al siguiente enlace: